INVESTIGACIÓN SOBRE TUBERCULOSIS. DIFERENCIACIÓN CON TÉCNICAS GENÉTICAS.

INNOVA.

Estudio molecular de cepas

Una estudiante de la Universidad de Panamá hizo una investigación sobre un método que permite hacer un análisis más rápido de las cepas que causan tuberculosis.

Conocer cómo se distribuyen las poblaciones de bacterias y sus distintas variedades desde el punto de vista genético, es importante para establecer programas de control sanitario.

CORTESÍA/D.Sambrano/ Amador Goodridge

Extracción del ADN de ‘Mycobacterium tuberculosis’.1108229

La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecto contagiosa crónica, que puede afectar a personas de cualquier edad, sexo, o grupo humano. Es causada por un microorganismo bacilar llamado Mycobacterium tuberculosis y su centro primario de ataque es el pulmón, pero puede afectar cualquier parte del cuerpo.

Entre los síntomas principales de la enfermedad se pueden mencionar: fiebre leve, sudoración nocturna, fatiga, pérdida de peso y tos persistente, aunque algunas personas pueden no presentar síntomas.

Según informes del Ministerio de Salud, la enfermedad ataca con mayor frecuencia a quienes viven en contacto con personas que tienen TB y que no están recibiendo tratamiento adecuado; quienes usan drogas o están débiles, ya sea por mala nutrición o por ser de edad avanzada; o a quienes tienen un sistema inmunológico comprometido, como en el caso de las personas con sida.

Existen diversas cepas de M. tuberculosis, que poseen en su genoma distintas secuencias. La diferenciación de las cepas ayuda a realizar estudios sobre su patogenecidad (qué tanto daño causan), inmunogenecidad (el grado de respuesta inmunológica a una vacuna) y a identificar mutaciones que crean resistencia a los medicamentos.

En los últimos años se han estado usando técnicas moleculares basadas en la presencia o ausencia de ciertos fragmentos de ADN y en la comparación del genoma completo del microorganismo.

Con la información que proporcionan estas técnicas, en Panamá se podría establecer una base de datos que permita distinguir, por medio de diferencias genotípicas, entre cepas de TB ya identificadas de otras, que se podrán comparar con registros disponibles en redes internacionales. De esta manera se podrían determinar acciones para el control y seguimiento de la enfermedad.

INVESTIGACIÓN EN PANAMÁ

Dilcia Sambrano es una estudiante de la escuela de Biología de la Universidad de Panamá que acaba de sustentar su tesis sobre la genotipificación de Mycobacterium tuberculosis.

La estudiante de 25 años explica que en el país no existe un registro genético de las distintas cepas, sino que se clasifican según su crecimiento y el color que adquieren en cultivos.

En Panamá, dice, el riesgo de tener tuberculosis después de la infección primaria es mayor dentro de los 12 a 24 meses y puede persistir de por vida. Pero, como no se analizan las distintas cepas genéticamente, no se sabe si se trata de nuevos casos o de infecciones que no han sido controladas con anterioridad.

Sambrano tardó alrededor de un año y medio en su estudio, apoyado por la organización Neotropica. En los laboratorios del Instituto de Investigaciones Científicas Avanzadas Servicios de Alta Tecnología, extrajo el ADN de cepas de tuberculosis proporcionadas por el Complejo Hospitalario Arnulfo Arias Madrid de la Caja de Seguro Social.

El ADN de las cepas fue amplificado por el método de reacción en cadena de polimerasa (PCR) y analizado en un gel de agarosa a través de electroforesis, una técnica en la que se hacen separaciones en el material genético. Así se obtiene un patrón de bandas (especie de “código de barras”), representado por una serie de 12 bandas, que es característico para cada cepa.

Sambrano utilizó un método llamado MIRU-VNTR, que se basa en el número de veces que una secuencia se repite en forma adyacente dentro del genoma de la bacteria, y que ayuda a conocer e identificar específicamente el tipo de microorganismo que ha enfermado a las personas.

Con este conocimiento se puede hacer un diagnóstico más rápido y eficiente, y no tendrán que esperar meses con un tratamiento que no es el adecuado, sino que la identificación de la cepa permite conocer, por ejemplo, si es de tipo resistente, para tratarla entonces con medicamentos específicos.

Entre las ventajas de este análisis están que no se requiere mucho ADN, los costos de las pruebas son relativamente bajos y los datos obtenidos son reproducibles entre laboratorios. Ahora, añade, se debe tener mucho cuidado al manejar las cepas y evitar la contaminación en el laboratorio.

Por otro lado, la doctora Oris Sanjur, especialista en biología molecular del Instituto Smith- sonian de Investigaciones Tropicales, explica que este análisis no conlleva ningún tipo de riesgo para la persona, ya que se lleva a cabo fuera del paciente.

Para Sambrano, este método “pudiera ser considerado como una técnica que permitiría al país ser uno de los primeros en tener una base de datos sobre las diferentes cepas de tuberculosis presentes, y así poder desarrollar estudios de epidemiología en caso de brotes en pacientes con sida o en aquellos que son resistentes a los medicamentos”.

OTROS DATOS

• Muestras: Se analizaron 85 muestras; 45 eran únicas y 13 estaban agrupadas con un mismo perfil genético; cuatro fueron policlonales y 23 tenían una condición atípica.

• Estadísticas: Según el Minis- terio de Salud, en la semana epidemiológica número 41 (del 5 al 11 de octubre de 2008) se reportaron mil 5 casos de tuberculosis en Panamá.

En 2007, para ese mismo periodo se registraron mil 18 casos.